在生化研究工作中，常常需要使用緩沖液來(lái)維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到研究工作的成效。如果“提取酶”實(shí)驗(yàn)體系的pH值變動(dòng)或大幅度變動(dòng)，酶活性就會(huì)下降甚*喪失。所以配制緩沖液是一個(gè)*的關(guān)鍵步驟。
下面就由我來(lái)給大家講講緩沖液的配置方法：
只要知道緩沖對(duì)的PH值，和要配制的緩沖液的pH值(及要求的緩沖液總濃度)，就能按公式計(jì)算[鹽]和[酸]的量。這個(gè)算法涉及對(duì)數(shù)換算，較麻煩，前人為減少后人的計(jì)算麻煩，已為我們總結(jié)出pH值與緩沖液對(duì)離子用量的關(guān)系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH，經(jīng)查表便可計(jì)算出所用緩沖劑的比例和用量。例如配制500nm pH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。
經(jīng)查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升(1M=1 mol/L)，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配制100ml 0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。
計(jì)算好后，按計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確稱好固態(tài)化學(xué)成分，放于燒杯中，加少量蒸餾水溶解，轉(zhuǎn)移入50ml容量瓶，加蒸餾水刻度，搖勻，就能得到所需的緩沖液。
各種緩沖液的配制，均按表格按比例混合，某些試劑，必須標(biāo)定配成準(zhǔn)確濃度才能進(jìn)行，如醋酸、氫氧化鈉等。另外，所有緩沖溶劑的配制計(jì)量都能從以上的算式準(zhǔn)確獲得。
認(rèn)識(shí)作用：
分析測(cè)試中，在絡(luò)合滴定和分光光度法等許多反應(yīng)里都要求溶液的pH值保持在一個(gè)范圍內(nèi)，以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等，這些條件都是通過(guò)加入一定量的緩沖液達(dá)到的，所以緩沖溶液是分析測(cè)試中經(jīng)常需要的一種試劑。 采用電位滴定法測(cè)定外加酸或堿對(duì)不同配比同一種緩沖溶液的滴定曲線，不僅有助于理解緩溶液及緩沖容量的概念而且對(duì)分析測(cè)試中正確選緩沖液的配制方法及用量具有指導(dǎo)意義。
采用電位滴定法測(cè)定的滴定曲線，選擇 了常見(jiàn)的氨水-氯化銨緩沖液，分別按照不同的配比得到4種緩沖液，實(shí)驗(yàn)測(cè)定了強(qiáng)酸、強(qiáng)堿對(duì)緩沖 溶液的滴定曲線，滴定結(jié)果直觀清晰，對(duì)理解緩沖容 量的概念及實(shí)踐中的選擇有積極的意義。
同時(shí)，我們?nèi)梭w的正常生理環(huán)境的維持也離不開它，認(rèn)識(shí)學(xué)習(xí)有利于我們深入認(rèn)識(shí)人體復(fù)雜化學(xué)反應(yīng)的機(jī)制。它維持著人體正常的血液p H范圍。其中碳酸-碳酸氫鈉是血漿中主要的緩沖對(duì)，此對(duì)緩沖機(jī)制與肺的呼吸功能及腎的排泄和重吸收功能密切相關(guān)。正常人體代謝產(chǎn)生的二氧化碳進(jìn)入血液后與水結(jié)合成碳酸,碳酸與血漿中的碳酸氫根離子—組成共軛酸堿對(duì)，所以它在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中有著重要的意義。
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