LB培養(yǎng)基是一種用于微生物或細(xì)胞培養(yǎng)的實驗室耗材,它由一個圓盤形的底部和一個蓋子組成。盤的底部很小,蓋子很大,底部用于培養(yǎng),培養(yǎng)基的材料基本上分為兩類,主要是塑料和玻璃,玻璃培養(yǎng)基可用于植物材料,微生物培養(yǎng)和動物細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)。塑料培養(yǎng)基可以由聚乙烯材料制成,一次性使用,適用于實驗室接種,劃線和細(xì)菌分離操作,并且可以用于植物材料的培養(yǎng)。
在清洗LB培養(yǎng)基時,培養(yǎng)基通常經(jīng)歷浸泡,刷涂,酸洗和沖洗四個步驟,我們這里主要講解玻璃培養(yǎng)基,玻璃器皿應(yīng)浸泡在清水中以軟化并溶解附件,新玻璃器皿在使用前必須用自來水短暫擦洗,然后在5%鹽酸中浸泡過夜。用過的玻璃培養(yǎng)基通常會伴有大量的蛋白質(zhì)和油脂,干燥后不易擦洗,因此使用后應(yīng)立即浸入清水中進(jìn)行擦洗。
將浸泡過的玻璃培養(yǎng)基放入洗滌劑水中,然后用軟刷反復(fù)擦洗,不要留下死角,以免損壞餐具的表面光潔度,清洗干凈的玻璃培養(yǎng)基,將其干燥,然后準(zhǔn)備酸洗。
酸洗是將上述器皿浸入清潔溶液中,該溶液也稱為酸溶液,該溶液通過酸溶液的強氧化作用除去器皿表面上可能殘留的物質(zhì),酸洗時間應(yīng)不少于六個小時,通常是一整夜或更長時間。
擦洗和酸洗后的培養(yǎng)基必須用水充分沖洗,酸洗后是否將培養(yǎng)基清洗干凈直接影響細(xì)胞培養(yǎng)的成敗。手動清洗浸泡的餐具,每個器具必須反復(fù)“充空”至少15次,最后浸入蒸餾水中2-3次,干燥或干燥后包裝以備后用。
LB培養(yǎng)基在使用前先進(jìn)行清潔和消毒,因為培養(yǎng)基是否干凈對實驗工作有較大影響,這可能會影響培養(yǎng)基的pH值。如果有某些化學(xué)物質(zhì),它將抑制細(xì)菌的生長,新購買的培養(yǎng)基應(yīng)先用水沖洗,然后在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%或2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時,以除去游離的堿性物質(zhì),然后用蒸餾水沖洗兩次。要培養(yǎng)細(xì)菌時,請使用高壓蒸汽(通常為Pa高壓蒸汽的5冪的6.8 * 10),在120℃的溫度下滅菌30分鐘,在室溫下干燥或用干熱滅菌,即將培養(yǎng)基放在烘箱中,將溫度控制在約120℃并保持2小時,這可以殺死細(xì)菌的胞牙。