培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有水、氮源、無機(jī)鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。
LB培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時(shí)間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管,均改制成粉末。
有些人自己購買培養(yǎng)基配制后,總是會(huì)出現(xiàn)沉淀的現(xiàn)象。下面小編為您總結(jié)可能出現(xiàn)沉淀的幾種原因:
一、稱量錯(cuò)誤:天平稱量不準(zhǔn)確、計(jì)算稱量錯(cuò)誤導(dǎo)致配制培養(yǎng)基的濃度不正確,都有可能導(dǎo)致岀現(xiàn)部分沉淀。
二、水質(zhì)不佳:多數(shù)培養(yǎng)基的制備需要使用純化水、去離子水配制,而天然水中含有含有較多的礦物鹽離子,若錯(cuò)誤的使用了自來水,礦泉水配制,或使用的純化水離子未除凈,都有可能導(dǎo)致培養(yǎng)基滅菌后岀現(xiàn)渾濁現(xiàn)象或沉淀(磷酸鹽含量高的培養(yǎng)基更易出現(xiàn)此類問題。
三、培養(yǎng)基pH不正確:偏酸或偏堿的pH有可能使培養(yǎng)基中的部分金屬離子產(chǎn)生沉淀。
四、容器不干凈:新開封的容器或容器清洗不干凈,內(nèi)壁留有雜質(zhì),都會(huì)導(dǎo)致滅菌后的培養(yǎng)基中有雜質(zhì)出現(xiàn)。
五、培養(yǎng)基本身有沉淀:培養(yǎng)基配方中無機(jī)鹽成分較多,或培養(yǎng)基本身含有不溶性成分,滅菌后會(huì)有沉淀存在,此為正?,F(xiàn)象,不影響使用。例如MC、TTB、BS等,配方中含有不溶物,滅菌后有沉淀。
六、溶解不充分:培養(yǎng)基滅菌前應(yīng)充分?jǐn)嚢锜嶂?溶解,方可進(jìn)行滅菌。若滅菌前未將培養(yǎng)基溶解*就進(jìn)行滅菌處理,滅菌后易出現(xiàn)絮狀或團(tuán)塊狀沉淀,如 Fraser培養(yǎng)基含有大量磷酸鹽,若滅菌前未進(jìn)行充分溶解,滅菌過程中磷酸鹽易結(jié)成塊滅菌后不溶解。
七、滅菌方式不正確或滅菌過度:含有不耐熱成分的培養(yǎng)基,若滅菌過度或加熱過度,都有可能導(dǎo)致滅菌后的培養(yǎng)基顏色不正確或?qū)绗F(xiàn)沉淀。如亞硒酸氫鈉胱氨酸増菌液(SC),正常制備好的培養(yǎng)基應(yīng)為淡黃色透明液體,澄凊無沉淀,若加熱過度則培養(yǎng)基中亞硒酸氫鈉分最終制備的培養(yǎng)基會(huì)出現(xiàn)紅色沉淀。
八、添加劑加入時(shí)溫度不正確:卵黃、血液等對(duì)溫度敏感的添加成分,若加入時(shí)溫度過高或溫差過大,易岀現(xiàn)凝塊或絮狀沉淀。