Cy為花菁(Cyanine)的縮寫,也叫菁染料。經(jīng)典的菁染料含有兩個含氮雜環(huán),分子內(nèi)部含有由甲川基(CH)n組成的共軛鏈,n可為奇數(shù)/偶數(shù)。Cy系列熒光染料常被用于蛋白、抗體以及小分子化合物的標記。
本文著重分享了不同Cy染料的特點和應(yīng)用,歡迎大家關(guān)注收藏~~
Cy概述與產(chǎn)品說明
Cyanine(Cy)系列染料是具有多聚次甲基橋鏈化學(xué)結(jié)構(gòu)特點的一類熒光染料。Cy染料的次甲基橋鏈(1-7個次甲基)兩端常常連著兩個氮原子,其中一個氮原子帶正電,從而Cy染料形成具有離域正電荷效應(yīng)的介離子化合物。因為這個結(jié)構(gòu)特點,Cy染料的消光系數(shù)ε非常高。橋鏈長度和兩端的發(fā)色團直接控制著染料的吸收峰和發(fā)射峰值,從而讓Cy系列染料可以覆蓋從紫外到遠紅外的幾乎所有常用熒光譜帶。
本文主要討論用于生物標記的Cy染料,它們都有兩個對稱的indolenine發(fā)色團。這種構(gòu)架讓Cy染料的非特異性吸附少,消光系數(shù)ε高,熒光量子產(chǎn)率高,從而使其具有背景弱,信號強的優(yōu)勢。在細胞熒光標記中,Cy染料常常取代FITC,F(xiàn)AM和羅丹明等熒光染料。同時,Cy系列熒光染料也常用于生物篩選,蛋白免疫印跡,生物醫(yī)學(xué)顯影,小動物體內(nèi)成像等。
【Cy與Sulfo-Cy】
一般的,Cy系列熒光染料包含兩種異構(gòu)體的形式,一種是非磺化花青素(non-sulfonated cyanines),一種是磺化花青素(sulfonated cyanine)。
非磺化Cy染料的水溶性通常比較低。在標記生物分子時,常常需要加入有機溶液(一般是DMF或DMSO)。常規(guī)操作是將染料先溶于有機溶劑中,然后按比例加入到生物分子的水溶液中反應(yīng)。反應(yīng)完成后離心除去沉淀的染料,再透析除去未反應(yīng)的染料小分子。非磺化Cy染料易溶于氯仿,甲醇,THF,乙腈等常規(guī)有機溶劑,適用于有機合成反應(yīng)。因此,非磺化Cy染料可以直接在有機溶劑中與有機小分子反應(yīng),標記小分子或者高分子材料。
磺化Cy染料在其發(fā)色團上各有兩個硫酸離子官能團,所以這類染料具有非常好的水溶性。在對樣品水溶性要求較高時,磺化Cy染料是更好的選擇?;腔?,Cy染料的熒光譜圖發(fā)生了非常小的藍移,這是一個非常普遍的現(xiàn)象,藍移后激發(fā)峰和發(fā)射峰仍在儀器的檢測范圍之內(nèi),所以不必更改儀器參數(shù)。因此,Cy與Sulfo-Cy具有相同的骨架結(jié)構(gòu),光譜性質(zhì)幾乎一致,在大多數(shù)情況下可以交換使用。
Cy free acid系列是一類含有游離的、未活化的單官能團羧酸,其中Cy free acid是非水溶性形式,Sulfo-Cy free acid是磺酸化的高水溶性形式。在多數(shù)情況下,該系列染料不具有反應(yīng)活性,適用于樣品對照或儀器校準。
【Cy SE與Sulfo-Cy SE】
Cy SE是非水溶性形式的染料,Sulfo-Cy SE是磺酸化的高水溶性形式染料,被廣泛用于標記肽、蛋白質(zhì)和寡聚體等生物分子。Cy系列染料除了用于標記生物分子外,也常被用于動物活體成像。由于細胞和組織的自發(fā)熒光在近紅外波段小,而近紅外光在生物組織中的穿透深度較大,因此在檢測復(fù)雜生物系統(tǒng)時,Cy系列染料能提供更高的特異性和靈敏度。同時,Cy系列染料還擁有紫外光區(qū)染料和同位素標記無法具備的生物安全性,有利于在活體生物中監(jiān)測標記分子的分布。
【DBCO-Cy】
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菁染料衍生物氮雜二苯并環(huán)辛(DBCO)是一種通用的標記試劑,常用于檢測含有疊氮化物的分子或化合物。環(huán)辛烯類化合物可用于促進無銅疊氮炔環(huán)加成反應(yīng)。這種二苯并環(huán)辛烯將與含疊氮官能團的化合物或生物分子反應(yīng),不需要Cu2+催化劑即可產(chǎn)生穩(wěn)定的三唑鍵。由于不含金屬離子催化劑,所以不會造成細胞毒性,適合生物正交化學(xué)或生物正交點擊化學(xué)的活體應(yīng)用。此外,與傳統(tǒng)的DBCO-Cy3和DBCO-Cy5相比,DBCO-Cy3-3和DBCO-Cy5-3水溶性更好。
應(yīng)用范圍
更多產(chǎn)品
產(chǎn)品貨號 | 產(chǎn)品名稱 |
IC8640 | Preactivated PE-Cy5 Maleimide |
IC8810 | Preactivated APC-Cy5.5 Maleimide |
IC8820 | Preactivated PE-Cy5.5 Maleimide |
IC8830 | Preactivated PerCP-Cy5.5 Maleimide |
IC8920 | Preactivated APC-Cy7 Maleimide |
IC8930 | Preactivated PE-Cy7 Maleimide |
IC8340 | Tyramide-Cy3 |
IC8630 | Tyramide-Cy5 |
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