EDTA脫鈣液的操作步驟:
1、骨組織脫鈣時(shí),取材不易過厚,一般大約 5mm。
2、組織固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min。
3、組織用蒸餾水洗清洗 3 次,每次 20min。
4、組織轉(zhuǎn)移 20~30 倍體積的 EDTA脫鈣液中,脫鈣 10~30 天或更長(zhǎng)時(shí)間。如果想加快脫鈣速度,可以置于 37℃進(jìn)行脫鈣。如果必要,更換新的 EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣,多數(shù)組織脫鈣 2 周~3 個(gè)月即可,每周更換一次,直終點(diǎn)。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設(shè)在 200W 左右的檔位,每次加熱 5min,依據(jù)組織厚度和密度重復(fù) 3~5min,中間間隔 3~5min。
5、用蒸餾水沖洗數(shù)次。
6、常規(guī)脫水、包埋。
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