產(chǎn)品名稱:AB-PAS染色試劑盒
產(chǎn)品型號:G1285
產(chǎn)品特點:AB-PAS染色試劑盒PAS 技術顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)。
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AB-PAS染色試劑盒
貨號:G1285
有效期:6 個月有效。
產(chǎn)品簡介:
糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一,McManus 在 1946 年使用 PAS 技術顯示黏蛋白,
該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸
性物質(zhì)。
阿利新藍和 PAS 技術聯(lián)合使用可鑒別同一組織切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。這種技術也
常用作廣泛檢測黏蛋白的手段。該技術染色陰性,可明確斷定該物質(zhì)不是黏蛋白。在大多數(shù)方法中,
切片先經(jīng)標準的阿利新藍(pH 值為 2.5)染色,在使用 PAS 技術。阿利新藍可將唾液黏蛋白、硫黏
蛋白和蛋白多糖染成藍色。PAS 技術可將中性黏蛋白染成深紅/紅紫色,同時將既含中性黏蛋白有含
酸性黏蛋白的組織和細胞染成深淺不同的紫色,這是有于阿利新藍與 Schiff 試劑結合并反應。上述
染色常可出現(xiàn)在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白的小腸杯狀細胞中。
阿利新藍是類銅鈦花青染料,這種陽離子染料與酸性基團結合,也即阿利新藍與組織內(nèi)含有的
陰離子基團如羧基和硫酸根形成不溶性復合物。分子中帶正電荷的鹽鍵與酸性黏蛋白多糖物質(zhì)中帶
負電荷的酸性基團結合形成不溶性的復合物而呈藍色,再于 PAS 進行復合染色,就能顯示三種不同
黏液物質(zhì)成分。
自備材料:
1、蒸餾水
2、系列乙醇
操作步驟(僅供參考)
1、脫蠟水,蒸餾水水洗 2min。
名稱 編號 6×50ml 6×100ml Storage
試劑(A)阿利新藍染色液 50ml 100ml 4℃ 避光
試劑(B)氧化劑 50ml 100ml 4℃ 避光
試劑(C)Schiff Reagent 50ml 100ml 4℃ 避光
試劑(D)蘇木素染色液 50ml 100ml 4℃ 避光
試劑(E)酸性分化液 50ml 100ml RT
試劑(F)Scott 藍化液 50ml 100ml RT
2、阿利新藍染色液染色 10-20min。
3、蒸餾水洗 3 次,每次 1-2min。
4、放入氧化劑中進行氧化 5min。
5、Schiff Reagent 浸染 10-20min。
6、傾去 Schiff Reagent,流水沖洗 10min。
7、蘇木素染色液染核 1-2min,水洗。
8、用酸性分化液分化 2-5s,水洗。
9、用 Scott 藍化液返藍,水洗 3min。
10、逐級常規(guī)乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。
染色結果:
糖原、中性黏蛋白、各種糖蛋白——紫紅色
酸性黏蛋白(硫黏蛋白和唾液黏蛋白)——藍色
蛋白多糖和透明質(zhì)酸——藍色
備注:含有中性黏蛋白和酸性黏蛋白的細胞或組織可染成不同程度的藍紫色紫色。
注意事項:
1、切片脫蠟應盡量干凈,否則影響染色效果。
2、氧化劑氧化時間不宜過久,氧化時的溫度以 18-22℃。
3、試劑(A)、試劑(B)、試劑(C)應置于 4℃密閉保存,使用時避免接觸過多的陽光和空氣。使用前,提前 30min 取出恢復到室溫后,避光暗處使用。
4、酸性分化液應經(jīng)常更換新液,其分化時間應該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和酸性分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應該足夠。
5、切片在氧化劑和 Schiff Reagent 中作用時間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織的類別等決定。
6、如用蘇木素染色液復染細胞核時一定要淡染,以免影響陽性物質(zhì)觀察,目的是防止胞漿或黏蛋白著色而掩蓋阿利新藍的顏色。
7、研究表明,阿利新藍-PAS 聯(lián)合技術的染色順序可影響終結果。PAS 技術在阿利新藍染色之前時,中性黏蛋白和糖原可染成紫色。與此相反,阿爾辛藍染色在 PAS 技術之前時,則可將這些物質(zhì)染成預期的紫紅色。
8、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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AB-PAS染色試劑盒
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