產(chǎn)品名稱:Solarbio 大鼠骨髓單個核細胞分離液試劑盒
產(chǎn)品型號:P8980
產(chǎn)品特點:Solarbio 大鼠骨髓單個核細胞分離液試劑盒注意事項:A. 開封前顛倒混勻,本分離液為無菌產(chǎn)品,為延長分離液保存時間,請在無菌條件下啟封,避免微生物污染。B. 分離液使用時應(yīng)始終保持室溫(18℃~25℃),如室內(nèi)溫度較低,可將分離液預(yù)熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心,可能會導(dǎo)致白膜層中紅細胞污染加重。C. 待分離的組織要求新鮮,避免冷凍和冷藏。
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Solarbio 大鼠骨髓單個核細胞分離液試劑盒
單個核細胞分離方法 1. 制備骨髓的單細胞懸液。 2. 取一支適當(dāng)?shù)碾x心管,加入與骨髓單細胞懸液等量的分離液(分離液少不得少于3 mL,總體積不能超過離心管的三分之二,否則會影響分離效果)。 3. 小心吸取單細胞懸液加于分離液液面上,注意保持兩液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取單細胞懸液,然后小心的平鋪于分離液上,因為兩者的密度差異,將形成明顯的分層界面。) 4. 室溫,500~900g,離心20~30min。(根據(jù)骨髓單細胞懸液的量確定離心條件,單細胞懸液量越大,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件可以自行摸索,以達到分離效果)。 5. 離心后,此時離心管中由上下細胞分四層。層為稀釋液層;第二層為環(huán)狀乳白色單個核細胞層;第三層為透明分離液層;第四層為紅細胞層。 6. 用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色單個核細胞層另一潔凈的15mL 離心管中,向離心管中加入10ml細胞洗滌液洗滌白膜層細胞,250g,離心10min。 7. 棄上清,5mL的PBS或細胞清洗液重懸細胞,250g,離心10min。 8. 重復(fù)步驟7 9. 棄上清,細胞重懸備用。 骨髓單細胞懸液的制備方法小動物骨髓的采集: 1. 處死動物,無菌提取股骨和脛骨,剪去兩端軟骨,露出紅色的骨髓腔(注意盡可能少的剪走骨髓腔)。 2. 取1ml的無菌注射器,吸取少量的含有10%標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清的稀釋液或者是含有血清的培養(yǎng)基,沖洗骨髓腔以獲得骨髓。 3. 終制備成2×10 8–1×10 9 /ml 的單細胞懸液備用。大動物骨髓的采集:分層示意圖大動物骨髓的采集可采取活體穿刺方法:先將動物麻醉、固定、局部除毛、消毒皮膚,然后估計好皮膚到骨髓的距離,把骨髓穿刺針的長度固定好。操作人員用左手把穿刺點周圍的皮膚繃緊,右手將穿刺針在穿刺點垂直刺入,輕輕左右旋轉(zhuǎn)將穿刺針鉆入,當(dāng)穿刺針進入骨髓腔時常有落空感。連接注射器緩慢抽吸骨髓組織,當(dāng)注射器內(nèi)抽到少許骨髓時即停止抽吸。用含10%標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清的稀釋液調(diào)整細胞濃度為2×10 8–1×10 9/ml 的單細胞懸液備用。常用的骨髓穿刺點:股骨:穿刺部位在股骨內(nèi)側(cè)面,靠下端的凹面處;胸骨:穿刺部位是胸骨體與胸骨柄連接處;肋骨:穿刺部位是第5~7肋骨各點的中點;脛骨:穿刺部位是股骨內(nèi)側(cè)、靠下端的凹面處。如果穿刺采用的是肋骨,穿刺結(jié)束后要用膠布封貼穿刺孔,防止發(fā)生氣胸。 注意事項: A. 開封前顛倒混勻,本分離液為無菌產(chǎn)品,為延長分離液保存時間,請在無菌條件下啟封,避免微生物污染。 B. 分離液使用時應(yīng)始終保持室溫(18℃~25℃),如室內(nèi)溫度較低,可將分離液預(yù)熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心,可能會導(dǎo)致白膜層中紅細胞污染加重。 C. 待分離的組織要求新鮮,避免冷凍和冷藏。 D. 部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其帶有的靜電作用,可能會導(dǎo)致細胞掛壁影響分離效果。 E. 如果要進一步對分離的細胞進行培養(yǎng),那在制備單細胞懸液和分離過程中,注意無菌操作,避免微生物污染
Solarbio 大鼠骨髓單個核細胞分離液試劑盒
產(chǎn)品特點:
1. 產(chǎn)品內(nèi)毒素水平已低于 0.12EU/ml、0.06EU/ml 甚可忽略不計;
2. 產(chǎn)品經(jīng)過逐瓶燈檢基本可控制其中不含不溶性微粒物;
3. 產(chǎn)品原料具有生物安全性和可追溯性;
4. 產(chǎn)品全生產(chǎn)過程*按照國家 GMP 標(biāo)準(zhǔn)操作流程進行;
5. 產(chǎn)品包裝瓶的安全性及可追溯性;
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