產(chǎn)品名稱:Solarbio GoldView ‖型核酸染色劑(5000×)
產(chǎn)品型號:G8142
產(chǎn)品特點:GoldView II 是一種可代替溴化乙錠(EB)的新型花青類核酸染料,采用瓊脂糖電泳檢測DNA 時,GoldViewII 與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生很強的熒光信號,其靈敏度比EB 強5-10 倍,使用方法與之*相同。GoldView II 與核酸結(jié)合后,Z大吸收峰為497nm,另外,其在254nm 處也有一強吸收峰,發(fā)射波長為520nm,在紫外透射光下雙鏈DNA 呈現(xiàn)綠色熒光。
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使用方法:
膠染:
由于GoldView II 敏感度比EB 高數(shù)倍,使用時,請將商品化的Marker 用1×DNA Loading Buffer 作5-10
倍的稀釋,上樣1-10*l, 以得到較好的結(jié)果。而對于待檢測樣品,通常僅需1-2*l 即可。如果濃度較高,也須
作一定倍數(shù)的稀釋,否則會造成條帶不整,影響遷移速率。凝膠回收請選擇點染方法。
1. 將50ml 瓊脂糖凝膠溶液(濃度一般為0.8%~2%)在微波爐中融化。
2. 冷卻不燙手時加入10*l GoldView II,輕輕搖勻,避免產(chǎn)生氣泡。
3. 倒膠,待瓊脂糖凝膠*凝固后上樣電泳。
4. 電泳完畢在紫外燈下觀察。若使用數(shù)碼相機照像記錄,則關(guān)閉相機的閃光燈,放在自動檔即可;若使
用凝膠成像系統(tǒng)照相,通過調(diào)節(jié)光圈、曝光時間,選擇合適的濾光片,可得到成像清晰的照片。
點染:
染色效果不如膠染方法,但成本更低,同時適用于凝膠回收。
1. 常規(guī)方法制備不含任何染料的瓊脂糖凝膠。
2. 用1x Loading Buffer 將本產(chǎn)品稀釋100-1000 倍,現(xiàn)用現(xiàn)配。
3. 取稀釋后的染料5*l 與1-2*l 樣本混勻后上樣即可(膠回收時可加入過量樣本)。
注意事項:
1. 膠厚度不宜超過0.5cm,膠太厚會影響檢測的靈敏度。
2. 要想得到較好的實驗結(jié)果,請將商品化的Marker 用1×DNA Loading Buffer 作一定的稀釋,一般在5-20
倍左右稀釋后上樣1-10*l,請自行摸索佳稀釋倍數(shù)。
3. 雖然未發(fā)現(xiàn)GoldView II 有致癌作用,但其由DMSO 溶解,對皮膚、眼睛會有一定的刺激,操作時應(yīng)戴上手套。
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