產(chǎn)品名稱:瓊脂糖凝膠親和層析介質(zhì) rProtein A
產(chǎn)品型號:R8290
產(chǎn)品特點(diǎn):瓊脂糖凝膠親和層析介質(zhì) rProtein A品牌:Solarbio | 貨號:R8290 別名 : rProtein A Beads 英文名稱 : rProtein A Beads 單位 : 瓶
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瓊脂糖凝膠親和層析介質(zhì) rProtein A
核酸電泳是進(jìn)行核酸研究的重要手段,是核酸探針、核酸擴(kuò)增和序列分析等技術(shù)所*的組成部分。核酸電泳通常在瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中進(jìn)行,濃度不同的瓊脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子篩網(wǎng)孔大小不同的凝膠,可用于分離不同分子量的核酸片段。以下中間介紹的是瓊脂糖核酸電泳操作步驟。
瓊脂糖凝膠親和層析介質(zhì) rProtein A
瓊脂糖核酸電泳操作步驟
1.用蒸餾水將制膠模具和梳子沖洗干凈,放在制膠平板上,封閉模具邊緣,架好梳子;
2.根據(jù)欲分離DNA片段大小用凝膠緩沖液配制適宜濃度的瓊脂糖凝膠:準(zhǔn)確稱量瓊脂糖干粉,加入到配膠用的三角燒瓶內(nèi),定量加入電泳緩沖液(一般20~30?ml);
3.放入到微波爐內(nèi)加熱熔化。冷卻片刻,加入一滴熒光染料,輕輕旋轉(zhuǎn)以充分混勻凝膠溶液,倒入電泳槽中,待其凝固;
4.室溫下30~45分鐘后凝膠*凝結(jié),小心拔出梳子,將凝膠安放在電泳槽內(nèi);
5.向電泳槽中倒入電泳緩沖液,其量以沒過膠面1mm為宜,如樣品孔內(nèi)有氣泡,應(yīng)設(shè)法除去;
6.在DNA樣品中加入10×體積的載樣緩沖液(loading?buffer),混勻后,用槍將樣品混合液緩慢加入被浸沒的凝膠加樣孔內(nèi);
7.接通電源,紅色為正極,黑色為負(fù)極,切記DNA樣品由負(fù)極往正極泳動(dòng)(靠近加樣孔的一端為負(fù))。一般60~100V電壓,電泳20~40min即可;
8.根據(jù)指示劑泳動(dòng)的位置,判斷是否終止電泳;
9.電泳完畢,關(guān)上電源,在凝膠成像儀上觀察電泳帶及其位置,并與核酸分子量標(biāo)準(zhǔn)Marker比較被擴(kuò)增產(chǎn)物的大小。
瓊脂糖凝膠分離DNA片度大小范圍較廣,瓊脂糖核酸電泳操作步驟中要注意的是,不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長度從200bp近50kb的DNA片段。瓊脂糖通常用水平裝置在強(qiáng)度和方向恒定的電場下電泳。
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